保藏原理?

来源:百度文库 编辑:神马文学网 时间:2024/05/01 17:45:25
☆ 水是生物细胞的主要组分,约占活细胞总量的90%,在0℃或0℃以下时会结冰。样品降温速度过慢,胞外溶液中水分大量结冰,溶液的提高,胞内的水分便大量向外渗透,导致细胞剧烈收缩,造成细胞损伤,此为溶液损伤。另一方面,若冷却速度过快,胞内的水分来不及通过细胞膜渗出,胞内的溶液因过坑而结冰,细胞的体积膨大,最后导致细胞破裂,此为胞内冰损伤,因此,控制降温速率是冷冻微生物细胞十分重要的步骤,现在可以通过以下两个途径来克服细胞的冷冻损伤:

 

 

保护剂:也称分散剂,在需冷冻包藏的微生物样品中加入适当的保护剂可以使细胞经低温冷冻时减少冰晶的形成,如:甘油,二甲亚砜,谷氨酸钠,糖类,可溶性淀粉…

 

 

玻璃化:固体在自然界中有两种形式,即晶体和玻璃化,物质的质点呈有序排列或具有格子构造排列的称为晶态,即晶体.反之,质点作不规则排列的则为玻璃态,即玻璃化.玻璃化不会使生物细胞内外的水在低温下形成晶体,细胞不受损伤.---实现玻璃化可以通过降温速率和提高溶液浓度两种形式达到.

 

 

所以应该迅速解冻,取0.1ml培养于液体培养基(营养肉汤)即可,

 

至于鉴别嘛,我个人是取培养物鉴别的,常规鉴别方法