神马文学网白花蛇舌草乙醇提取物对肺腺癌A549/DDP细胞的耐药逆转及其机制_第2页_中国论文下载中...
来源：百度文库 编辑：神马文学网 时间：2024/04/28 01:08:56
来源：中国论文下载中心 [ 10-08-31 10:10:00 ] 作者：作者：高宝安， 陈世 编辑：studa20 -
3 结果
3.1 白花蛇舌草乙醇提取物对肺癌A549/DDP耐药细胞的耐药逆转作用MTT结果见表1，DDP对A549和A549/DDP细胞的抑制作用呈浓度依赖性。DDP对A549细胞的IC50为27.90 μmol/L，对A549/DDP细胞的IC50为287.19 μmol/L，A549/DDP的耐药倍数为10.294。而经过白花蛇舌草乙醇提取物（40 mg/ml）作用后的A549/DDP细胞DDP的IC50为155.85 μmol/L，耐药倍数为5.586。表1 不同浓度DDP作用72 h对A549和A549/DDP细胞的抑制作用（略）
3.2 白花蛇舌草乙醇提取物对肺癌A549/DDP耐药细胞MRP mRNA表达的影响A549/DDP细胞的MRP mRNA的表达（A值为1.025±0.133）显著高于A549细胞（A值为0.106±0.018）（P﹤0.01）；而白花蛇舌草乙醇提取物则使A549/DDP细胞MRP mRNA的表达明显减少（A值为0.537±0.062）（P﹤0.01），但仍高于A549细胞MRP mRNA的表达（P﹤0.01），如图1所示。
3.3 白花蛇舌草乙醇提取物对肺癌A549/DDP耐药细胞MRP 蛋白表达的影响Western Blot检测显示，A549/DDP细胞的MRP蛋白表达显著高于A549细胞的表达；白花蛇舌草乙醇提取物能够减少A549/DDP细胞MRP蛋白的表达。结果见图2。
4 讨论
肺癌化疗疗效的降低，主要是肺癌细胞对化疗药物产生耐药性所致，因此积极寻找有效的肺癌化疗耐药逆转的有效方法是肺癌治疗的研究热点。研究表明［4，5］，多种中药如鸦胆子油乳、苦参碱、姜黄素等具有不同程度逆转肿瘤多药耐药的作用。白花蛇舌草是临床广泛使用的抗肿瘤中药之一，现代研究表明［6～8］，其主要化学成分有熊果酸、免疫多糖、乌索酸、白花蛇舌草素等，这些主要的有效成分具有增强免疫活性、抗氧化和抗肿瘤活性。我们研究结果显示，A549/DDP细胞对DDP的耐药倍数为10.294，白花蛇舌草乙醇提取物（40 mg/ml）能够明显降低A549/DDP细胞对DDP的耐药性（耐药倍数由10.294下降至5.586），增敏倍数高达1.843倍。
肺癌细胞的多药耐药与P-糖蛋白（P-gp）、多药耐药相关蛋白（MRP）、肺耐药相关蛋白（LRP）、谷胱甘肽S转移酶、拓扑异构酶、细胞膜离子通道等多种因素相关，其中MRP在肺癌细胞表达的增强是重要的耐药机制之一。MRP的主要作用是在消耗ATP的基础上将细胞内的阳离子或细胞毒性物质逆浓度梯度转运出细胞，降低细胞核内的药物浓度，使药物对DNA靶点的绝对浓度降低，并可改变胞浆和细胞器的pH值及通过囊泡转运和胞吐作用将药物排出细胞，使药物到达其作用部位的浓度减少、药物活性成分脱离其作用部位和胞内药物浓度降低，从而使细胞产生耐药性［9，10］。我们研究结果表明，白花蛇舌草乙醇提取物能够明显抑制肺癌A549/DDP耐药细胞MRP mRNA和蛋白的表达，从而增加肺癌细胞内DDP的浓度和分布，进而发挥对肺癌A549/DDP细胞的耐药逆转作用。
综上所述，白花蛇舌草乙醇提取物对肺腺癌A549/DDP细胞株具有耐药逆转作用，其逆转作用可能通过减低膜表面转运蛋白MRP的表达来实现，其具体机制有待进一步的研究。