自家疫苗的制备与使用

来源:百度文库 编辑:神马文学网 时间:2024/04/28 22:50:36
( 发布时间: 2008-1-4 8:17:55 浏览量:695            )
自家疫苗是取自本养殖场患畜的内脏为病料,提取病料中含有的病原体(细菌或病毒),通过甲醛灭活后作为抗原,接种到自家家畜自制的疫苗。用自家疫苗可对本场家畜发生的传染病起到防疫保护作用,今年夏季在我县暴发高致病性猪蓝耳病期间,为了开展生产自救,弥补国家发放的疫苗不足,在县畜牧局化验室制备了自家疫苗,对数万头生猪进行了免疫注射,对流行在我县的高致病性猪蓝耳病起到了一定控制作用。为今后制出更好的自家疫苗与同行们一起作些技术探讨。
 
一、制作过程
 
1、采集病料 病料取自症状典型病程较长或濒临死亡的病猪,病料组织为病原体侵害的靶器官,以高致病性猪蓝耳病为主症的,应取肺、肝、淋巴结。采集的病料迅速作冷冻处理以防变质。
 
2、切碎 用1000U/ml的双抗液冲洗病料表面,将冷冻的病料切成小块(除去筋膜气管及较粗的支气管,摘除心脏,但一定要取出肺门淋巴结),便于放入搅拌机中。
 
3、搅碎 将碎块放入高速匀浆机中搅拌4-6次,搅成肉浆糊。
 
4、稀释 按病料与生理盐水1:3-5的比例向肉浆糊中加入生理盐水成稀泥状。
 
5、过滤:将上步制成物分三次过滤,第一次用一层纱布过滤,第二次用两层纱布过滤,第三次用四层纱布过滤。(每次的滤渣丢弃,滤液待用)向滤液加入生理盐水至所需要制作的量。
 
6、醛化量 用适量的生理盐水稀释甲醛和溶解叠氮钠。(甲醛用量占自家苗量的千分之八;叠氮钠用量占自家苗量的万分之五)
 
7、混合 将第6所制作的溶液加入第5所制作的滤液中。(边搅拌边加入)
 
8、振荡 将第7步所制作的溶液置振荡器上1小时,放入37℃培养箱中72小时(其中每隔4-6小时拿出来置振荡器振荡20-30分钟),然后于2-8℃冷藏保存待用。
 
二、使用方法
 
1、无菌检查 将灭活后的自家组织苗接种普通琼脂培养基上,37℃培养24-72h,未见有细菌生长。
 
2、先用自家苗注射一两窝小猪,观察两天,看有无发生过敏反应、注射部位发生炎症。如果没有上述反应说明自家苗制作成功。
 
3、效力试验 采集10头注射自家苗15天仔猪的血清,用猪蓝耳病抗体ELISA检测试剂盒检测效果。
 
4、临床观察 假定健康的若干头仔猪、母猪和育肥猪注射自家苗后,若未再发生类似的临床症状,则表明效果明显。
 
5、使用量 母猪产前4周注射10ml/头,乳猪:7-9日龄肌注1ml/头,15-18日龄注射2ml/头,小猪(30-35日龄)3ml/头,中大猪5-10ml/头。
 
6、加双抗液:自家苗在临用时需加S.P.液或双抗液。其配制方法:青霉素(40万U)5支,链霉素(200万U)1支,共同溶于200ml灭菌无离子水中,混合后分装小瓶,置-10℃~-20℃冰箱保存备用(1万单位/ml)。临用时,按1%的量加入营养液或其他溶液中,最后浓度是青霉素100U/ml,链霉素100U/ml。
 
三、讨论与体会
 
1、在高致病性猪蓝耳病发病期间,我县制备使用的自家苗,注射生猪达数万头之多,通过临床观察有预防和治疗的双重作用,对控制我县高致病性猪蓝耳病的流行起到了一定作用。如水田坝乡在高致病性猪蓝耳病发病期间,采用自家苗普注的方法,据水田坝乡畜牧兽医服务中心观察发病数减少,有明显的预防控制作用;对病猪注射自家苗后有一定的治疗作用。如水田坝乡辛家坪村李某猪场发生高致病性猪蓝耳病已死亡7头,剩下存栏 65 头全部是病猪,用自家苗每头注射10-15ml后,放弃治疗,不再用其它任何药物,只是每天用口服补液盐让其自饮,数天后患病猪逐惭恢复,除死亡3头外,其余全部痊愈。相当部分管片兽医反映有类似情况。
 
2、影响自家疫苗质量和效果的因素很多:1)取自活体病程长的猪的病料效果要好;2)使用来自本地、本场猪病料制作的自家苗效果要好;3)自家苗适宜的浓度效果要好;4)对假定健康猪防疫效果要好;5)病料采后迅速降温冷冻保存不腐败制作的自家苗效果要好;6)制作中充分灭活的自家苗效果要好。
 
3、自家苗治疗作用的机理不明,可能性是自家苗中的特异性抗体的作用,也可能是异体蛋白的刺激激活了免疫系统而提高了机体免疫力。其机理尚须研究。