中西复方免疫增强剂对鸡新-支二联苗的免疫增强试验

鸡新城疫（ND）和鸡传染性支气管炎（IB）是影响养鸡业的一种常见传染病，发病率和死亡率较高，严重威胁着养鸡业的发展，近年来人们采用免疫增强剂提高新-支二联苗的免疫效果，收到了较好疗效。但是目前一些化学药物免疫增强剂存在毒副作用和污染残留较强的弊端，中草药免疫增强剂又多以粉散剂拌料应用，使用不方便，而中西药结合的复方免疫增强剂的免疫增强作用尚未见报道，为此笔者将从中草药中提取出的有效活性成分的多糖，与具有免疫增强作用的化学药物结合，制备出了缓释中西复方免疫增强剂，对鸡新-支二联弱毒疫苗的免疫增强效果进行了研究试验，现介绍如下。
一、材料与方法
（一）试验材料
缓释中西复方免疫增强剂：由黄芪多糖、淫羊藿多糖、左旋咪唑、维生素E、　　钠制成颗粒剂，重约0.25克/粒，本课题组研制。
1%鸡红细胞悬液，鸡新城疫（ND）4单位抗原和鸡传染性支气管炎（IB）4单位抗原：本课题组随用随配。
鸡新-支二联弱毒疫苗：批号为兽药生字（2006）080072038，黑龙江生物制品一厂生产。
另外，还有96孔V型板、微量滴管、稀释棒等器械。
（二）试验方法
将80只30日龄的蛋鸡，随机分成试验组和对照组，分别皮下注射新-支二联弱毒疫苗2头份/只，同时给试验组鸡投服缓释复方免疫增强剂1粒/只，对照组不投服。在免疫前、免疫后10、20、30和40天，每组随机采5只鸡血样，分离血清后用HI试验测定新城疫、传染性支气管炎的抗体效价，用E玫瑰花环形成试验（ERFC）测定T淋巴细胞ERFC形成率。
二、试验结果
1.可显著提高新-支二联弱毒疫苗的抗体效价
试验前新城疫和传染性支气管炎抗体效价均较低，试验组与对照组差异不显著（P＞0.05），免疫后10和40天，试验组新城疫抗体效价显著高于对照组（P＜0.05）；免疫后20和30天，试验组新城疫抗体效价高于对照组，差异极显著（P＜0.01）。结果表明，免疫后10、20、30和40天，试验组传染性支气管炎抗体效价均显著高于对照组（P＜0.05）。
表1  抗体效价测定结果（㏒2. X±S）
2.可使新-支二联弱毒疫苗 T淋巴细胞ERFC形成率显著升高
试验前T淋巴细胞ERFC形成率均较低，试验组与对照组差异不显著（P＞0.05）。免疫后10和20天，两组T淋巴细胞ERFC形成率均逐渐升高，差异显著（P＜0.05）或极显著（P＜0.01）；免疫后30和40天，两组T淋巴细胞ERFC形成率均逐渐降低，差异显著（P＜0.05）或极显著（P＜0.01）。
表2  鸡T淋巴细胞ERFC形成率测定结果（% .X ±S）
三、试验小结
（一）中、西药免疫增强剂可显著增强机体体液免疫功能
体液免疫是机体抵抗传染病的主要因素之一，抗体是介导体液免疫的重要分子，抗体效价的高低直接反应机体的体液免疫状态。免疫增强剂能够促进抗体的产生，延缓抗体的下降或消失，黄芪多糖(APS)具有促进免疫功能和抗体生成，提高巨噬细胞活性和血清IgG水平，抑制EAS，双向调节血糖等作用。李宏全等（2001）将黄芪多糖分别与新城疫Ⅰ系苗、Ⅳ系苗、油乳剂苗和传染性法氏囊冻干苗以肌肉注射、皮下注射、点眼、滴鼻等不同方式配合使用，均可使鸡血清中新城疫和传染性法氏囊病的抗体效价在相同日龄、不同日龄、不同黄芪多糖用量3种情况下显著高于未使用组，显示了明显的免疫增强作用；程志斌等（2002）报道，黄芪多糖能使小鼠脾脏内浆细胞增生，促进抗体生成，增强体液免疫。
淫羊藿是补肾壮阳中药，主要含淫羊藿甙、黄酮、多糖等多种有效成分，刘家国等（2000）检测结果显示，淫-蜂佐剂抗原组兔血清特异性抗体水平显著高于无佐剂抗原组，抗体高水平维持的时间更长，产生的时间亦更早。
近年来研究发现左旋咪唑( LEV)具有特异性和非特异性抗体增强作用，韩雪清等(1996)试验表明，左旋咪唑具有增强传染性法氏囊和新城疫苗联合免疫的免疫应答，即具有抗传染性法氏囊对新城疫的干扰作用，鸡口服左旋咪唑 7~14天即可表现出免疫增强作用。
同时有关研究还证实硒能提高畜禽的体液免疫和细胞免疫功能，增强机体对传染病的抵抗力。邓桦等（2001）在雏鸡新城疫疫苗二次免疫前2天起，连续3天以　　钠饮水给予不同剂量硒，结果新城疫HI抗体滴度显著或极显著地高于对照组，红细胞Ⅰ型补体受体（CRⅠ）活性较对照组高。
维生素E可激活B淋巴细胞的抗原增殖，参与从IgM到IgG抗体合成的转化。姚金水等（1994）试验表明维生素E-硒注射液，对蛋用雏鸡新城疫HI抗体和淋巴细胞ANAE阳性率均比对照组有明显提高。
本研究试验将中草药中的有效活性成分黄芪多糖、淫羊藿多糖与具有免疫增强作用的西药左旋咪唑、维生素E、　　钠有机结合起来，取长补短，相互协调，发挥各自药物优势，以粘合剂为骨架，研制出中西药相结合的鸡用缓释复方免疫增强剂，配合鸡新-支二联弱毒疫苗免疫蛋鸡，显著或极显著地提高了新城疫和传染性支气管炎的抗体效价，表明鸡用缓释复方免疫增强剂能够促进抗体产生，增强体液免疫功能。
（二）中、西药免疫增强剂可显著增强机体细胞免疫功能
细胞免疫反应过程主要包括淋巴细胞的增殖与分化、淋巴因子的分泌，免疫的主要效应细胞是T细胞、自然杀伤细胞和NK细胞。T淋巴细胞ERFC形成试验能够检测外周血液中T淋巴细胞百分数，敏感地反应机体细胞免疫水平和动态变化，有关研究发现免疫增强剂能够提高T淋巴细胞百分率、E-玫瑰花环形成率、外周血淋巴细胞或脾细胞对植物血凝素、刀豆蛋白A或脂多糖等丝裂原刺激的转化能力。
唐雪明等（1998）研究表明，黄芪多糖对21、35日龄雏鸡T淋巴细胞转化功能有增强作用；淫羊藿具有增强正常免疫动物T淋巴细胞功能，提高IL-2生产水平等作用。
胡元亮等（2000）对雏鸡注射淫羊藿-蜂胶合剂可显著提高雏鸡T淋巴细胞转化率和NK活力，提高细胞免疫和母鸡的体液免疫功能。
乔彦良等(2000)研究表明左旋咪唑可影响正常鸡的免疫功能，显著促进鸡外周血T淋巴细胞增殖，但对B淋巴细胞无明显影响，2.5～10毫克/千克左旋咪唑可使CD+4/CD+8淋巴细胞比值明显升高。
硒和维生素E具有协同作用，能明显提高NK细胞活性和T淋巴细胞转化率，文杰等（1996）在日粮中添加80毫克/千克维生素E，可以提高28日龄肉鸡血液淋巴细胞转化率。
本研究试验通过缓释复方免疫增强剂配合鸡新-支二联弱毒疫苗免疫蛋鸡，可以显著或极显著地提高鸡T淋巴细胞ERFC形成率，表明该免疫增强剂能够增强鸡细胞免疫功能。而且鸡用缓释复方免疫增强剂给药途径方便，在鸡体内释放缓慢，药效维持时间较长，对于增强鸡的免疫功能，预防鸡新城疫和传染性支气管炎的发生具有重要作用，值得推广应用。
作者简介：作者简介：刘瑞生(1968-),男,硕士,助理研究员,从事畜禽疾病防治研究工作。