浅淡中药色谱指纹图谱技术

1、中药指纹图谱的基本含义

经过多年来的植物化学和药理药效研究，其中特别是近几十年来对中药药效的深入研究，人们越来越认识到中药的药效不是来自单一的活性化学成分，而是来自多种活性成分之间的协同作用，甚至是与某些非活性成分的“协同效应”或“生克作用”。因此，很多时候单一的活性化学成分或指标成分并不能很好地评价中药的真伪和优劣。特别是，有些不法企业利用单一指标成分在质量控制上的局限性，采用指标成分勾兑的方法来蒙混指标检测，结果是“指标合格”了，工艺过程是否“合格、合法”就无从得知，这也成了保证中药安全有效的隐患。因此，在加强药品食品企业生产流程监管的同时，改变这种单一指标评价的质量控制体系是必然途径。既然单一指标存在很大的局限性，那么一个“指标群”呢？这也就是“中药指纹图谱质量控制”的思想雏形。

现代“指纹（Finger prints）鉴定” 始于19世纪末20世纪初的犯罪学（criminology）和法医学。人的指纹有拱形、环形、螺纹形三种模式，这是指纹所具有的共性；而每一个人的指纹在微小的细节构造上各有不同，这种“唯一性”的指纹则形成了据以鉴别每个人的特征。中药色谱指纹图谱鉴别是借用法医学的指纹鉴定的概念，但不是概念的重复。如果说法医学指纹强调的是绝对的“个体特异性’，那么中药色谱指纹图谱赖以鉴别中药的真伪优劣所要强调的则是作为药用植物物种的“共有特征性”。因此，中药色谱指纹图谱更强调的是物种特征的“唯一性”和同种个体之间的“相似性”。

更值得指出的是，常规意义的“指纹”分析的依据是主要来源于先天的遗传，而中药药用化学成分的指纹图谱分析依据却主要来源于该植物物种后天的代谢产物，且大多为植物的次生代谢物，它对后天的生长环境的依赖性很强，远比纯先天性遗传的“指纹”脆弱得多，故有中药“道地性”和“最佳采集时间”之说。然而，植物的代谢过程仍受其物种先天遗传的影响，所以，利用中药药用化学成分的色谱指纹图谱是完全可以对不同药材种属进行鉴别，对同种药材质量优劣进行评价的。

2、中药指纹图谱的定义和特性

中药色谱指纹图谱是一种综合的、可量化的色谱鉴定手段。借以鉴别真伪，评价原料药材、半成品和成品质量“均一性”和“稳定性”。其基本属性是“整体性”和“模糊性”。

这一定义说明中药色谱指纹图谱是一种综合的、整体的鉴定手段，其功用范围在于鉴别真伪，并还可评价药材的质量均一性和稳定性。从其综合和整体性能看，它可准确且又可量化地对药材进行真伪鉴别和质量评价，而从细节上看，中药色谱指纹图谱又是很模糊的，尤其是因为生药有“道地性”和“采集时间因素”的实际情况，使人很难给出一个对所有药品都适用的共有峰和非共有峰的比例，更不能像西药那样要求一一对应。

3、中药色谱指纹图谱的建立原则及其在评价中药质量中的作用

色谱指纹图谱的目的是全面反应中药所含内在化学成分的种类与数量，所以，应体现系统性、特征性和稳定性三个基本原则。

系统性，即指纹图谱所反映的化学成分，应包括中药有效部位所含大部成分的种类，或指标成分的全部。特征性，即指纹图谱中反映的化学成分信息（具体表现为保留时间或位移值）具有高度选择性，能特征地鉴定中药的真伪与优劣，成为中药自身的“化学条码”。稳定性，即所建立的指纹图谱，在规定的方法与条件下，不同的操作者和不同的实验室应能做出相同的指纹图谱，其误差应在允许范围内，方可以保证指纹图谱的使用具有通用性和实用性，这是作为标准方法所必备的特征之一。

色谱指纹图谱在评价中药质量中的作用可以总结为：①观察色谱指纹图谱的整体特征以鉴别生产前药材原料的真伪；②指纹图谱可以区分植物药材的不同部位；③指纹图谱可以考察商品药材及成药的质量；④从标准色谱指纹图谱可追踪制剂中某些化学成分的变化；⑤指纹图谱可以监测原料与成品之间、成品的批间质量的稳定性。

4、实例运用

近年来，杭州创新中药标准化研究所在承担的诸多横向课题中，就“指纹图谱”的质量控制做了很多细致的研究工作，积累了相当的经验，取得可观的社会效益和经济效益。如“淡水珍珠HPLC指纹图谱质量控制”（受浙江山下湖珍珠集团股分有限公司委托）、“灵芝色谱指纹图谱的质量控制”（受金华寿仙谷药业有限公司委托）等项目签订合同金额达60余万元，为相关企业的产品质量控制和市场开拓提供了有力的保障和推动作用。

如“淡水珍珠HPLC指纹图谱质量控制”，是通过建立珍珠蛋白的氨基酸HPLC指纹图谱，以此对比其它检测样品蛋白氨基酸组成，来鉴别真伪。珍珠蛋白的氨基酸HPLC指纹图谱如下图所示。

关于蛋白的质量控制，最常规是测定“含氮量”，显然，含氮量合格，并不能确保所测蛋白即为判定蛋白。但若介入“氨基酸指纹”判定，就可以准确下结论了，因为诸如鱼肉蛋白、牛奶蛋白、蛋清蛋白、珍珠蛋白其氨基酸组成肯定是不一的，“三聚腈胺”最常见的“氮指标添加剂”为化工原料，就根本淡不上氨基酸组成了。

总之，中药色谱指纹图谱技术研究工作也只是刚刚起步，在技术上还存在诸多问题，如何把握好指纹图谱的“整体性”和“模糊性”，需要更多细致的工作。完成好中药色谱指纹图谱技术研究工作有利于中药现代化，有利中药相关产品走出国门，走向国际市场。