薄层色谱指纹图谱技术检测瑶源葆春胶囊的方法

来源:百度文库 编辑:神马文学网 时间:2024/03/28 17:45:30
 瑶源葆春为绞股蓝提取浸膏加入玫瑰茄提取干膏、葡萄籽提取物直接制成的胶囊剂,制备过程不添加淀粉、白糖粉、硬脂酸镁、羧甲基淀粉钠等任何辅料。瑶源葆春胶囊现行质量标准仅检测总黄酮的含量,由于天然植物有效成分具有协同作用的可能和植物原料随季节的不同其有效成分含量亦有差异的现实,仅靠测定总黄酮的含量不能准确反映每批产品功效的统一性,故现采用薄层色谱指纹图谱技术来检测瑶源葆春胶囊。
一、检测方法
1、仪器与试药
CAMAG Scanner3 薄层色谱扫描仪;硅胶GF254预制板10×20cm;双槽展开缸;Grant XB14超声波清洗机。
对照品:绞股蓝总皂甙(自制)、人参皂苷Rb1(中国药品生物制品检定所)。
样品:为不同批号的瑶源葆春胶囊制剂,检测所用溶剂均为分析纯,水为纯化水。

 样品编号

 样品名称

 样品批号

 1

 瑶源葆春胶囊

 20090501

 2

 瑶源葆春胶囊

 20090502

 3

 瑶源葆春胶囊

 20090503

 4

 瑶源葆春胶囊

 20090504

2、方法
2.1  溶液制备
2.1.1 供试品溶液的制备  ①精密称取绞股蓝粗粉5g,加水80ml,超声振荡15min,过滤,残渣再加水60ml,超声振荡15min,过滤,合并两次滤液,用2%氢氧化钠溶液调至pH9~10,静置,滤除沉淀,滤液备用。
②大孔吸附树脂的准备  取D101型大孔吸附树脂5g,用95%乙醇浸泡过夜后,湿法装柱(1.0cm×28cm),继续用95%乙醇洗涤至流出液加等量水后几乎无白色浑浊为止。然后用去纯化水洗至无醇味。   
 ③纯化  将绞股蓝提取液以2m1/min的速度通过大孔吸附树脂柱②,待溶液全部进入柱后,用2%氢氧化钠溶液洗涤③,洗涤速度控制在5ml/min为宜。当流出液接近无色时,改用水洗,至流出液pH接近7为止。然后用95%乙醇洗脱,收集醇洗脱液至无绞股蓝皂苷洗出[薄层色谱法检查:硅胶H一CMC-Na板,正丁醇-乙酸乙酯-水(4:1:5)上层,5%磷钼酸乙醇液,110℃显色]。醇洗脱液加入少量活性炭回流10min④,趁热过滤,滤液回收乙醇至小体积,水浴蒸干,刮松,得白色鳞片状结晶,为绞股蓝总皂苷。
2.1.2  对照品溶液的制备  精密称取对照品人参皂苷Rb1适量,加乙醇溶解成每1ml含1mg的溶液。
2.2  薄层色谱鉴别
2.2.1  层析条件
薄层板:硅胶G薄层板5cm×l5cm。
     点样:供试液、对照液各10μ1。
     展开剂:正丁醇-乙酸乙酯-水(4:1:5,上层)。
     展开方式:上行展开约12cm。
     显色:喷硫酸-甲醇(1:1)溶液,105℃加热显色。
3、瑶源葆春胶囊TLCS-FP的建立
瑶源葆春胶囊的薄层扫描图谱见图1。

 
图1  瑶源葆春胶囊TLCS-FP

                                   

1绞股蓝总皂甙,2样品1,3样品2,4样品3,
5样品4,6人参皂甙Rb1。

4、综述
     检测结果表明,正丁醇-乙酸乙酯-水(4:1:5,上层)系统能较好地分离绞股蓝的有效成分群(三萜和黄酮类),Rf大小适宜。而其他展开系统则多对黄酮类或三萜类某类成分分离效果较好,绞股蓝整体有效成分指纹特征的提取则以本系统为佳。
     采用指纹图谱技术可以同时检测瑶源葆春胶囊成品的6个项目,与原标准仅检测总黄酮1个项目相比,更能保证不同批次瑶源葆春胶囊功效的统一性,避免由于原料季节不同而出现的功效偏差。从本实验看,四个批次的瑶源葆春胶囊均显示相同的图谱,表明生产瑶源葆春胶囊的原料来源稳定、生产工艺比较成熟。


鸣谢:感谢广西中医药研究院药理研究所对本试验给予的帮助。