神马文学网斐林试剂、双缩脲试剂以及班氏试剂
来源：百度文库 编辑：神马文学网 时间：2024/04/27 19:05:00
一、斐林试剂与双缩脲试剂
斐林试剂和双缩脲试剂都由氢氧化纳溶液和硫酸铜溶液组成，但二者有如下三点不同：
（1）溶液浓度不同
斐林试剂中氢氧化纳溶液称为斐林试剂甲，其浓度为0.1g/ml，硫酸铜溶液称为斐林试剂乙，其浓度为0.05g/ml；双缩脲试剂中氢氧化纳溶液（双缩脲试剂A）的浓度为0.1g/ml，硫酸铜溶液（双缩脲试剂B）的浓度为0.01g/ml。
（2）使用原理不同
斐林试剂是新配制的溶液，它在加热条件下与醛基反应，被还原成砖红色的沉淀，可用于鉴定可溶性还原糖的存在。用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色→棕色→砖红色（沉淀）。
鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂，发生的是双缩脲反应。双缩脲反应实质是在碱性环境下的与双缩脲试剂发生的紫色反应。而蛋白质分子中含有很多与双缩脲（NH2-CO-NH-CO-NH2）结构相似的肽键，所以蛋白质都能与双缩脲试剂发生颜色反应，可以用双缩脲试剂鉴定蛋白质的存在。
（3）使用方法不同
斐林试剂使用时，先将斐林试剂甲溶液和斐林试剂乙溶液混合（将硫酸铜溶液滴入氢氧化纳溶液中），而后立即使用：双缩脲试剂使用时，先加入氢氧化纳溶液（2mL），振荡摇匀，造成碱性的反应环境，然后再加入3~4滴硫酸铜溶液，振荡摇匀后观察现象。
二、斐林试剂与班氏试剂
（1）班氏试剂常用于尿糖的鉴定，其配方与斐林试剂不一样，其配方为：
①400mL水中加85g柠檬钠和50g无水碳酸钠；
②50mL加热的水中加入8.5g无水硫酸铜。制成溶液；
③把溶液倒入柠檬酸钠溶液中，边加边搅，如产生沉淀可滤去。
（2）其反应原理与斐林试剂略有差别。利用斐林试剂鉴定时，斐林试剂甲和斐林试剂乙直接反应生成和可溶性还原糖反应产生砖红色沉淀。而班氏试剂中的产生却是这样的：柠檬酸钠和碳酸钠均为强碱弱酸盐，在水中它们均可水解产生，与柠檬酸钠溶液和溶液混合时，结合，生成与葡萄糖中的醛基反应生成砖红色沉淀。
（3）两种试剂的保存方式不同。斐林试剂甲和斐林试剂乙可强烈产生，很容易沉淀析出，因此斐林试剂一般为现用现配；而班氏试剂的配方中，柠檬酸钠为一对缓冲物质，产生的数量有限，与溶液混合后产生的浓度相对较低，不易析出，因此该试剂可长期保存。
当然，无论用班氏试剂还是斐林试剂，归根结底都是与醛基在沸水浴加热条件下反应而生成砖红色的沉淀，两者反应现象一样，这就是二者的相同之处。