实验室常用试剂的配制Hanks液/PBS

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实验室常用试剂的配制 Hanks液/PBSTime:2009-12-25 AM 11:34  Author:bioer  Hits: 1058 times  -
1.无Ca2+ 、Mg2+Hanks液
NaCl                                 4.5g
KCl                                   0.2g
NaHCO3                         0.175g
Na2HPO4·12H2O          0.076g
KH2PO4                          0.03g
葡萄糖                             0.5g
0.4%酚红                        2.5ml
将上述成分依次溶解或加入到双蒸水中,最后补加双蒸水至500ml,以5.6%NaHCO3调整 pH 值至7.4,4℃冰箱保存备用。
2.甲基红试剂
(1)成份
甲基红      0.1g
蒸馏水      200ml
95%乙醇  300ml
(2)用途:测定甲基红反应。
3.Hanks液(原液)
原液甲: NaCl                              160g
KCl                                  8g
MgSO4·7H2O                2g
MgCl2·6H2O                  2g
上述试剂加入800ml双蒸水。溶解。
CaCl2   2.8g溶于100ml双蒸水
上述二液混合,加双蒸水至1000ml,再加2ml氯仿防腐,4℃保存。
原液乙:   Na2NPO4·12H2O                3.04g
KH2PO4                                1.2g
葡萄糖                                    20g
加入800ml双蒸水,溶解。
0.4%酚红溶液                      100ml
上述二液混合,加双蒸水至1000ml,再加2ml氯仿防腐,4℃保存。
使用时甲,乙原液按下列比例配成 Hanks 液
使用液:原液甲1份、原液乙1份、双蒸水18份滤过,8磅20min灭菌,放4℃冰箱保存,使用前用NaHCO3调整pH值。
4.0.4%酚红溶液
称取0.4g酚红置研钵中研碎,逐渐加入0.1mol/LNaOH并不断研磨,直到所有的颗粒几乎完全解,加入0.1mol/LNaOH 10ml,然后倒入容量瓶中,并加蒸馏水至100ml,棕色瓶保存备用。
5.pH7.2 Tris-NH4CI溶液(红细胞崩解液)
Tris  (三羟甲基氨基甲烷)          1.03g
NH4Cl(氯化氨)                        3.735g
加双蒸水至500ml,用浓HCl调pH=7.2,10磅15min灭菌后放4℃保存。
6.0.05moI/L pH8.6 巴比妥缓冲液
巴比妥                            1.84g
加蒸馏水                        200ml      加热溶解
巴比妥纳                       10.3g
叠氮纳                            0.2g
加蒸馏水溶解 , 并补加到 1000ml 。
7.磷酸盐缓冲液 (PB)
A 液:为 0.2mol/L 磷酸二氢钠水溶液,NaH2PO4 · H2O  27.6g, 溶于蒸馏水中,最后补加蒸馏水至 1000ml 。
B 液:为 0.2mol/L 磷酸氢二钠水溶液,Na2HPO4.7H2O 3.6g(或Na2HPO4·12H2O   71.6g,或Na2HPO4 · 2H2O 35.6g ), 加蒸馏水溶解,最后加水至 1000ml。若再加蒸馏水至200ml则成为0.1mol/LPB。
8.0.1mol/LPH8.4 硼酸缓冲液(BBS)
硼酸钠(Na2B4O7.10H2O)          0.46g
硼酸(H2BO3)                                0.51g
加蒸馏水至100ml 溶解。
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