凝血酶原时间2

【适用范围】

以手工法或凝血仪进行外源凝血系统诸因子活性筛选、测定、相关抑制物检测、口服抗凝剂及溶栓治疗监测。

【检测原理】

待测血浆中加入过量的组织凝血活酶浸出液（TF）和标准量Ca²⁺，激活FⅦ，并与FⅦa形成复合物，触发外源凝血系统，使血浆凝固所需的时间，即为PT；是外源凝血系统常用的非特异性筛选试验。

【试剂盒组成及主要成分】

1. PT试剂:(冻干品)(含兔脑组织凝血活酶、稳定剂、防腐剂)

2.PT复溶液（含Cacl₂、缓冲液、稳定剂、防腐剂）

3.说明书 (ISI值见试剂盒标签)

【贮存方法及有效期】

1．原包装试剂2-8℃密闭保存，有效期内稳定。

2．试剂复溶后：

2-8℃，5d稳定；18-25℃ 24h稳定；37℃ 8h稳定;

3．不用时2-8℃保存，可延长使用期，严禁冻融。

【样本采集与保存】

静脉采血，0.109M（3.2%）枸橼酸三钠与全血按1：9比例迅速混匀，2500g（3000r/min）离心15min，用塑料移液管取出上层血浆，2h内检测完毕。

有关标本收集和储存更详细内容，请见NCCLS文献H21-A3 ¹。

【测定方法】

1. 试剂准备：

PT试剂恢复至室温后，按瓶签上标明剂量，准确加入PT复溶液，置37℃预温30min，用前颠倒混匀；最好置入一磁力搅拌子，以使悬液保持均一状态，避免剧烈震荡。

敬告：本试剂盒内配备的复溶液仅限本试剂盒内试剂复溶时使用，请勿使用于其他批次试剂产品，以免影响测定结果。

2. 半自动血凝仪、手工测定

取待测（质控或参照）血浆100ul, （磁珠法加入测试珠1粒），37℃孵育3min，加入已预温至37℃的PT试剂200ul，记录凝固时间。手工法以出现不流动的初期凝固为终点。

3. 全自动血凝仪按相应说明书操作。

数据处理

1. 凝血酶原时间比值(PTR)=样品PT值/正常参考血浆PT值

2. 国际正常化比值(INR)=PTR^ISI

【参照范围】

1. 10-15s； ＞正常参照3s为异常；

2. INR：0.8-1.5；

各实验室应根据自己的特定人群、仪器及试剂确立自己的参考范围；或遵照NCCLS C28-A23方案建立本室参照范围：

【注意事项】

1. PT试剂复溶后，必须在37℃预温区中预温30min，以利 TF活性释放出来，保证实验准确。

2. 红细胞压积(Hct)<20% >55%，须调整抗凝剂用量：抗凝剂用量（ml）=0.00185×血量（ml）×（100-病人Hct）

3. INR报告适用于正常人和口服抗凝药稳定的病人；

4. INR报告不适用于肝病凝血因子缺陷、非抗凝治疗而PT延长、口服抗凝药初期（＜5d）病人PT结果分析。

【质量控制】

1. 每个工作日应同时做正常和异常对照血浆，并以质控血浆控制参考值，以排除仪器、试剂及技术操作异常等因素干扰；

2. 被检血浆重复性测定耐受限度如下：

（1） ＜15s： ±1.0s：

（2） 15-20s：±2.0s；

（3） ＞30s： ±4.0s；

【规格】 (ISI 值、具体规格及货号详见外包装及标签)

1. 试剂2ml×10瓶/盒; 复溶液 1瓶

2. （试剂1ml×10瓶/盒; 复溶液 1瓶）

【临床意义】

1. PT延长：

当APTT、TT正常时，见于FⅦ缺乏；

APTT、TT合并异常时，可见于FX、V、凝血酶原、FIB缺乏；

白血病、尤其是早幼粒细胞白血病、肝、肾疾病、DIC、原发性纤溶、口服抗凝剂（华法令等）、口服避孕药、维生素K缺乏、恶性贫血、循环抗凝物（如肝素、FDP等）及某些试剂和药物（如奎宁、有机砷、硫脲嘧啶、皮质类固醇、EDTA、冬酰胺酶、安妥明、乙醇等）均可使PT延长。

2. PT缩短：

高凝状态、血栓性疾病，AMI后数日内、静脉炎、PE最初几日内、FV增多症、口服避孕药、咖啡因、镇静安眠药、抗组胺剂、维生素K等可使PT缩短。

3. 抗栓酶类药物治疗监测：

维持PT在正常参照的1.5～2.0倍。

4. 口服抗凝剂监控：

监测Warfarin等，PT期望值为参考值的2倍（30s左右）为宜；INR 2.0～4.5，INR＞5.5，出血并发症可能。

5.术前准备：

⑴ 非髋关节手术： INR 1.5-2.5；

⑵ 髋关节手术： INR 2.0-3.0；.

6.预防原发、继发性静脉血栓形成：INR 2.0-3.0；

7.预防PE、复发性静脉血栓形成2.0-4.0；

8.预防动脉血栓栓塞(包括心脏) 3.0-4.5。

【参考文献】

1. NCCLS document H21-A3. NCCLS, Wayne, PA, 1998

2. NCCLS .approved guideline C28-A2.Wayne,PA:NCCLS.