神马文学网灭菌方法
来源：百度文库 编辑：神马文学网 时间：2024/04/29 12:46:45
灭菌（sterilization）指杀灭物体中所有病原微生物和非病原微生物及其芽胞、霉菌孢子的方法。
消毒（disinfection） 指杀灭物体中的病原微生物的方法。消毒只要求达到消除传染性的目的，而对非病原微生物及其芽胞、孢子并不严格要求全部杀死。
防腐（antisepsis） 指阻止或抑制微生物生长繁殖的方法。
无菌（asepsis）指没有活的微生物的状态。经过灭菌的物品是无菌的。采取防止或杜绝任何微生物进入动物机体或其它物体的方法，称为无菌法。以无菌法进行的操作称为无菌操作。
物理因素：
一.温度对微生物的影响
干热灭菌法
方法
原理
用途
火焰灭菌法
火焰直接烧灼，如接种环
热空气灭菌法
灭菌温度需160℃维持2 h
高温下不损坏、不变质的物品,如玻璃器皿、瓷器等的灭菌
湿热灭菌法
煮沸灭菌
煮沸10～20 min可杀死所有细菌的繁殖 体，芽胞常需煮沸1～2 h才被杀死
用于饮水、一般器械，如刀剪的消毒。
巴氏消毒法
以较低温度杀灭液态食品中的病原菌或特定微生物，而又不致严重损害其营养成分和风味的消毒法
高压蒸汽灭菌法
121.3℃温度下维持15～20min；应用此法灭菌，一定要充分排除灭菌器内原有的冷空气
用于普通培养基、生理盐水、耐热药品、手术敷料等
二. 辐 射
非电离
辐射
可见光
波长400～800nm，可见光线对微生物一般无多大影响，但长时间作用也能妨碍微生物的新陈代谢与繁殖
阳光
直射日光有强烈的杀菌作用，是天然的杀菌因素。
许多微生物在直射日光的照射下，半小时到数小时即可死亡。芽胞对日光照射的抵抗力比繁殖体大得多，往往需经20h才死亡。
紫外线
波长200-300nm部分有杀菌作用。实验室常使用的紫外线杀菌灯紫外线波长为253.7nm
常用于微生物实验室、无菌室、手术室等的空气消毒，或用于不能用高温或化学药品消毒的物品的表面消毒。还可用于诱变育种；对人体皮肤、眼睛有损伤作用，使用时应注意防护
电离辐射
和 X射线
热物品的灭菌消毒、食品保藏和育种等方面; 忌热物品的灭菌消毒、食品保藏和育种等方面； 食品消毒可以 不破坏营养成分
三. 其他方法：
干 燥
微生物在干燥的环境中失去大量水分，新陈代谢便会发生障碍，甚至引起菌体蛋白质变性和由于盐类浓度的增高而逐渐导致死亡。不同种类的微生物对干燥的抵抗力差异很大。
主要用于菌种和食品的保藏。
超声波
频率在20 000～200 000 Hz的声波称为超声波
主要用于裂解细胞，提取细胞组分
微 波
从几百兆赫至几十万兆赫频率的无线电波称为微波。所需时间短、加热均匀
主要用于陶瓷、耐热玻璃容器和塑料器皿，金属器皿忌用
滤 过
通过机械阻留作用将液体或空气中的细菌等微生物除去的方法。但滤过除菌常不能除去病毒、霉形体以及细菌L型等小颗粒
主要用于不耐高温的营养液、血清、抗菌素、空气等除菌
化学消毒剂
名称
常用浓度
原理
用途
酚类
石炭酸：2%-5 %
来苏：2%
高浓度使菌体蛋白凝固，低浓度破坏细菌的细胞膜，使胞质内容物渗出
地面、器具表面和皮肤的消毒
醇类
乙醇70%-75%
损伤细胞膜，使菌体蛋白变性， 灭活酶类
主要用于皮肤的消毒和体温计等的浸泡
重金属盐类
1%硝酸银
2%红汞
0.05-0.01%升汞
使细菌发生变性和沉淀；
使细菌的酶活性丧失
（1）1%硝酸银新生儿滴眼，预防淋球菌感染
（2）2%红汞用于皮肤、粘膜和小创伤的消毒
（3）0.05-0.01%升汞，非金属器皿的消毒
氧化剂
0.1%高锰酸钾
3%过氧化氢
2%-2.5%碘酒
0.2ppm-0.5ppm氯
10%-20%漂白粉
靠氧化作用，灭活酶类
使蛋白质变性
（1）0.1%高锰酸钾，皮肤、尿道、水果等
（2）3%过氧化氢，创伤、皮肤粘膜消毒
（3）2%-2.5%碘酒, 皮肤消毒
（4）0.2ppm-0.5ppm氯，饮水和游泳池消毒
（5）10%-20%漂白粉，地面、厕所与排泄物消毒
表面活性剂
新洁尔灭、杜灭芬
损伤细胞
灭活酶类
蛋白质沉淀
（1）0.05%-0.1%新洁尔灭，皮肤粘膜消毒、浸泡手术器械
（2）0.05%-0.1%杜灭芬，伤口冲洗，金属器械、塑料、橡皮类消毒
烷化剂
缺点：对人体有一定的毒性，且有的有致癌作用，如β-内脂
使菌体蛋白和核酸的烷基化
（1）10%甲醛，物品表面、空气消毒
（2） 2%戊二醛 ，精密仪器、内窥镜等消毒
消毒（disinfection） 指杀灭物体中的病原微生物的方法。消毒只要求达到消除传染性的目的，而对非病原微生物及其芽胞、孢子并不严格要求全部杀死。
防腐（antisepsis） 指阻止或抑制微生物生长繁殖的方法。
无菌（asepsis）指没有活的微生物的状态。经过灭菌的物品是无菌的。采取防止或杜绝任何微生物进入动物机体或其它物体的方法，称为无菌法。以无菌法进行的操作称为无菌操作。
物理因素：
一.温度对微生物的影响
干热灭菌法
方法
原理
用途
火焰灭菌法
火焰直接烧灼，如接种环
热空气灭菌法
灭菌温度需160℃维持2 h
高温下不损坏、不变质的物品,如玻璃器皿、瓷器等的灭菌
湿热灭菌法
煮沸灭菌
煮沸10～20 min可杀死所有细菌的繁殖 体，芽胞常需煮沸1～2 h才被杀死
用于饮水、一般器械，如刀剪的消毒。
巴氏消毒法
以较低温度杀灭液态食品中的病原菌或特定微生物，而又不致严重损害其营养成分和风味的消毒法
高压蒸汽灭菌法
121.3℃温度下维持15～20min；应用此法灭菌，一定要充分排除灭菌器内原有的冷空气
用于普通培养基、生理盐水、耐热药品、手术敷料等
二. 辐 射
非电离
辐射
可见光
波长400～800nm，可见光线对微生物一般无多大影响，但长时间作用也能妨碍微生物的新陈代谢与繁殖
阳光
直射日光有强烈的杀菌作用，是天然的杀菌因素。
许多微生物在直射日光的照射下，半小时到数小时即可死亡。芽胞对日光照射的抵抗力比繁殖体大得多，往往需经20h才死亡。
紫外线
波长200-300nm部分有杀菌作用。实验室常使用的紫外线杀菌灯紫外线波长为253.7nm
常用于微生物实验室、无菌室、手术室等的空气消毒，或用于不能用高温或化学药品消毒的物品的表面消毒。还可用于诱变育种；对人体皮肤、眼睛有损伤作用，使用时应注意防护
电离辐射
和 X射线
热物品的灭菌消毒、食品保藏和育种等方面; 忌热物品的灭菌消毒、食品保藏和育种等方面； 食品消毒可以 不破坏营养成分
三. 其他方法：
干 燥
微生物在干燥的环境中失去大量水分，新陈代谢便会发生障碍，甚至引起菌体蛋白质变性和由于盐类浓度的增高而逐渐导致死亡。不同种类的微生物对干燥的抵抗力差异很大。
主要用于菌种和食品的保藏。
超声波
频率在20 000～200 000 Hz的声波称为超声波
主要用于裂解细胞，提取细胞组分
微 波
从几百兆赫至几十万兆赫频率的无线电波称为微波。所需时间短、加热均匀
主要用于陶瓷、耐热玻璃容器和塑料器皿，金属器皿忌用
滤 过
通过机械阻留作用将液体或空气中的细菌等微生物除去的方法。但滤过除菌常不能除去病毒、霉形体以及细菌L型等小颗粒
主要用于不耐高温的营养液、血清、抗菌素、空气等除菌
化学消毒剂
名称
常用浓度
原理
用途
酚类
石炭酸：2%-5 %
来苏：2%
高浓度使菌体蛋白凝固，低浓度破坏细菌的细胞膜，使胞质内容物渗出
地面、器具表面和皮肤的消毒
醇类
乙醇70%-75%
损伤细胞膜，使菌体蛋白变性， 灭活酶类
主要用于皮肤的消毒和体温计等的浸泡
重金属盐类
1%硝酸银
2%红汞
0.05-0.01%升汞
使细菌发生变性和沉淀；
使细菌的酶活性丧失
（1）1%硝酸银新生儿滴眼，预防淋球菌感染
（2）2%红汞用于皮肤、粘膜和小创伤的消毒
（3）0.05-0.01%升汞，非金属器皿的消毒
氧化剂
0.1%高锰酸钾
3%过氧化氢
2%-2.5%碘酒
0.2ppm-0.5ppm氯
10%-20%漂白粉
靠氧化作用，灭活酶类
使蛋白质变性
（1）0.1%高锰酸钾，皮肤、尿道、水果等
（2）3%过氧化氢，创伤、皮肤粘膜消毒
（3）2%-2.5%碘酒, 皮肤消毒
（4）0.2ppm-0.5ppm氯，饮水和游泳池消毒
（5）10%-20%漂白粉，地面、厕所与排泄物消毒
表面活性剂
新洁尔灭、杜灭芬
损伤细胞
灭活酶类
蛋白质沉淀
（1）0.05%-0.1%新洁尔灭，皮肤粘膜消毒、浸泡手术器械
（2）0.05%-0.1%杜灭芬，伤口冲洗，金属器械、塑料、橡皮类消毒
烷化剂
缺点：对人体有一定的毒性，且有的有致癌作用，如β-内脂
使菌体蛋白和核酸的烷基化
（1）10%甲醛，物品表面、空气消毒
（2） 2%戊二醛 ，精密仪器、内窥镜等消毒