神马文学网尺寸排阻层析
来源：百度文库 编辑：神马文学网 时间：2024/04/28 18:34:57
尺寸排阻层析 Size-Exclusion Chromatography, SEC，又称 凝胶过滤层析（Gel Filtration Chromatography，GFC） 凝胶渗透层析（Gel Permeation Chromatography，GPC） 分子筛层析（Molecular Sieve Chromatography，MSC） 在高效液相色谱分析中，用GFC或SEC表示凝胶过滤色谱或尺寸排阻色谱，流动相通常是水溶液；在有机高分子分析中，常用GPC表示凝胶渗透色谱，流动相通常是有机溶剂；在蛋白质分离纯化中用GFC或SEC表示凝胶过滤层析或尺寸排阻层析；本文以下内容均针对蛋白质分离，因此均以凝胶过滤层析（GFC）表示。 分离机理 填料是由高分子交联而成、内部具有网状筛孔的固体颗粒，利用球状凝胶内的筛孔的大小，不同水力学半径的分子在通过填料时运行路径存在差异，利用该差异将不同大小的蛋白质进行分离。 蛋白质分子流过填充凝胶的管柱时，大分子无法进入凝胶筛孔，而只流经凝胶及管柱间的孔隙，因此总体运行路径较短，从层析柱入口到出口所需时间较短；较小的分子因为进入凝胶内的筛孔，总体运行路径较长，故在管柱内的停留时间较长；基于此原理可以区分大小不同的分子，亦可与已知大小的分子作比较而确定未知样品的分子量。 球形蛋白与线性分子在凝胶过滤层析中的保留行为存在差异，因此使用球形蛋白制作的分子量标准曲线不能用于明胶多肽、淀粉或其它聚合物。