牛初乳粉抗衰老作用的实验研究

来源:百度文库 编辑:神马文学网 时间:2024/04/18 14:10:37

 

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      牛初乳是指母牛分娩后5 d内分泌的乳汁,由于有苦涩味,加热易凝固等特点,过击一般不作原料乳应用而喂牛或被弃之。近年来,牛初乳的营养保健作用日益受到重视。大量研究表明,牛初乳具有很高的营养价值,含有丰富的生物活性物质,具有调节人体代谢,提高机体免疫力和抗感染的功能 但有关其抗衰老作用的系统研究报道很少。我们参照“保健食品的功能学评价程序和检验方法”研究了牛初乳粉对雌性小鼠部分脏器组织抗氧化酶活力、过氧化脂质含量及对果蝇寿命的影响,期探索牛初乳粉的抗衰老作用。
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      1 材料与方法
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      1.1 材料--本文来自益生康健网(yeecare.com)


      1.1.1 牛初乳粉由乌鲁木齐奶业研究所提供。它是该所采用冷冻干燥和辐照灭菌等方法制成的牛初乳制剂。--本文来自益生康健网(yeecare.com)


      1.1.2 美国野生型黑腹果蝇由华西医科大学营养与食品卫生学教研室提供
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      1.1.3 昆明种雌性小鼠由新疆医学动物实验中心提供,13~1s月龄。
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      1.1.4 小鼠饲料参照AOAC配方配制“、:蛋白质10.O(酪蛋白)、植物油8.0 、混合盐5.0%、混合维生素1 0 、纤维素(琼脂)1.0 、淀粉75.O
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      1.1.5 果蝇基础饲料 玉米粉10.0 、红糖5.O 、琼指1.5 苯甲酸0.3 、干酵母粉1.0 、水82.2 。
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      1.2 试剂与仪器
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      1.2.1 试剂焦性没食子酸(遵义市第二化工厂)、硫代巴比妥酸(上海酵母厂)、牛血清白蛋白(上海长阳生化制药厂)。二甲肿酸钠(Nacalai tesque inc)、四乙氧基丙烷(FIuka)、5,5一二硫对一二硝基苯甲酸(Fluka)。
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      1.2.2 仪器721一分光光度计(上海第三分析仪器厂)、匀浆器、离心机、恒温水浴箱、恒温箱、干燥箱、电子天平、培养管。
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      1.3 方法
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      1.3.1 小鼠部分脏器组织抗氧化酶活力和过氧化脂质含量测定
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      1.3.1.1 分组及喂养方法将小鼠随机分为3个实验组和1个对照组,试验组小鼠饮用蒸馏水配制的牛韧乳粉乳液(浓度分别为9.0 g/L、45.0 g,L和225.0 g/L),对照组小鼠饮用蒸馏水,各组小鼠均食用AOAC饲料,喂养30 d。1 3.1.2 血样稀释液制备取鼠血10m 加入1 ml双蒸水中,充分振摇,使之全部溶血测定。
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      1.3.1.3 肾、肝、心肌组织匀浆制备剪取一定量的所需脏器,称重,剪碎,至玻璃匀浆器中,加入冷生理盐水,打成匀浆(10 ,w/V),以3 000 r/rain离心30min,取上清液测定。
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      1.3.1.4 肾、肝、心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活力测定采用酃苯三酚自氧化法。组织蛋白质含量测定采用考马斯亮蓝法。
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      1.3.1.5 肾、肝、全血各胱甘肽过氧化物酶(GSH Px)活力测定采用DTNB直接法
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      1.3 1.6 肾、肝、心肌组织丙二醛(MDA)含量测定采用硫代巴比妥酸比色法
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      1.3.2 果蝇寿命试验收集12 h内羽化的果蝇,用乙醚麻醉后,区分雌雄。将果蝇随机分成3个剂量组和1个对照组,各剂量组饲料含受试物浓度分别为0.2 、1.O 和5.0 每组雌雄果蝇各40~50只。培养管规格为3 cmX]3 ct33.,每只管内培养基厚度为0.5~1.0cm,用双层无菌纱布封口。果蝇分组1w后给予受试物。培养管平放于温度25士1℃、相对湿度62 的恒温箱内,每4 d更换1次培养基,每天定时统计果蝇死亡数目,直到全部死亡。培养基牯住等因素造成的死亡不计算在内。规定每个果蝇生存时间的代数和除以果蝇数目即为该组平均寿命;前半数果蝇存活天数的均值为半数死亡期}每组虽后死亡的10只果蝇存活天数的平均数为该组的最高寿命。
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      2 结果
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      2.1 牛初乳粉对小g,Cgp~抗氧化酶活性和过氧化脂质含量的影响
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      2.1.1 牛初乳粉对小鼠肾、肝、心肌组织SOD活力的影响。
       可见,中、高剂量组小鼠肾、心肌组织SOD活力高于对照组小鼠,差别有显著性;各剂量组小鼠肝组织中SOD活力有增加的趋势,和对照组比较差别无显著性。
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      2.1.2 牛初乳粉对小鼠肾、肝、垒血GSH Px活力的影响
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      可见:高剂量组小鼠肾、肝和各剂量组小鼠垒血GSH Px活力高于对照组,差别均有显著统计学意义;中、低剂量组小鼠肾、肝组织中GSH-Px活力与对照组比较,差别无显著性。
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      2.1.3 牛韧乳粉对小鼠肾、肝、心肌组MDA形成的影响
       中、高剂量组小鼠肝及高剂量组小鼠心肌组织中MDA含量低于对照组,差别具有显著性;各剂量组小鼠肾组织中MDA含量与对照组比较,差别无显著性。
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      2.2 牛初乳粉对果蝇寿命的影响
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      2.2.1 牛初乳粉对果蝇半数死亡期的影响。
       可见;雌性果蝇半数死亡期延长的幅度为34.8 ~83.2 ,雄性果蝇半数死亡期延长的幅度为4 6 ~83.9 。除0.2 组雄性果蝇外,其余各组雌雄果蝇半数死亡期与对照组比较,差别均有显著性。
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      2.2.2 牛初乳粉对果蝇平均寿命的影响。
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      可见:雌性果蝇平均寿命延长幅度为17.7 ~40.1 ,雄性果蝇平均寿命延长幅度为13.7 ~30.7%。
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      2.2.3 牛初乳粉对果蝇最高寿命的影响。
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      牛初乳粉延长了雌性果蝇的最高寿命,幅度为3.5 ~8 1 ,中、高剂量组与对照组比较,差别有显著性;各剂量组雄性果蝇最高寿命与对E 组比较,差别无显著性。
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      3 讨论
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      自由基是一类具有高度化学反应活性的含氧基团,主要指超氧阴离子•07和氢氧自由基•OH,它们是需氧生物体内代谢正常产物,在机体内具有杀菌和参与前列腺素合成等积埙作用。在正常情况下,机体代谢不断产生自由基,同时又不断被机体存在的酶促和非酶促系统清除。随着增龄,机体清除自由基的能力减弱,过剩的自由基睫组织细胞生物大分子的化学结构发生破坏性改变,组织器官的机能逐步发生紊乱,机体逐渐趋于衰老。MDA是细胞膜脂质过氧化的终产物之~,溯定其含量可间接估计脂质过氧化的程度,它能与蛋白质发生交联,产生脂褐质,此物是老年斑的主要成份 MDA含量的增加除了与上面提到的自由基生成异常有关外,还可能是由于机体瞻质过氧化保护系统的抗氧化能力降低所致 本实验观察到喂高剂量牛初乳的小鼠肝、心肌组织MDA含量明显低于对照组,表明牛初乳扮可以提高小鼠机体的抗氧化能力,降低MDA含量。
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      生物体内存在多种防御自由基损伤的抗氧化酶类,SOD和GSH Px是比较重要的两种:SOD能催化•0f生成H 0 ,以清除•O 对细胞的毒害作用。GSH-Px是帆体存在的一种含酉清除自由基的酶系统,可将 O 分解,阻断脂质过氧化链锁反应,它是反映机体抗氧化能力的重要因素 本研究结果表明,牛初乳粉中高剂量组小鼠肾、心肌组织SO D活力和高剂量组小鼠肾、肝、全血GSH-Px活力均明显高于对照组小鼠,提示牛初乳粉可以通过提高机体抗氧化酶的生物合成而增加活力束抑制机体的脂质过氧化反应。
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      周之辉等用随机双盲对照法在老年人群中服用牛乳提取物(BCE)3个月.观察抗衰老作用。结果表明,BCE能提高老年人体内总超氧化物岐化酶(SOD)和锰一超氧化物岐化酶(Mn SOD)活力,降低脂质过氧化物含量。马宁 、等用牛初乳制剂喂养_牺尿病大鼠15 d后,红细胞SOD活力明显高r}}通饮食组小鼠,而MDA含量则降低;叶惟冷吼等给严重烫伤人鼠服l啊牛初乳脂质营养液25 d,显著提高了太鼠体内脂溶性维生索、3_胡萝l、素和SOD的水平、降低了LPO 的含量:配喝牛初乳具有机自rh基损伤的作用。本研究结果与上述报道的结果具响一致性。
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      从本文结果可见,牛初乳粉延长了雌雄果蝇的半数死亡期和平均寿命以盟雌性果蝇的最高寿命。在抗衰老药物的评定标准方面有两种不同意见:一些学者认为能延长生物平均寿命的药物属抗衰老药物,另一些学者则认为只有能延长生物龋高寿命的药物属抗衰老药物。叶恩赐 等认为半数死亡天数町代替千均寿命或是高寿命作为果蝇寿命试验的指标。从果蝇寿命试验的整体结果来看,牛初乳粉延长了果蝇的寿命。牛初乳粉对果蝇寿命的影响如同对小鼠体内抗氧化酶和过氧化脂厩的影响一样,总的趋势都是高浓度优于中、低浓度。并且在延长黑腹果蝇半数死亡期、平均寿命及最高寿命方面表现出性别上的差异,即对雌性果蝇效果优于雄性果蝇;这种差异是什么因素造成的尚有待研究。
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