神马文学网《微生物检验》精品课程1
来源：百度文库 编辑：神马文学网 时间：2024/04/19 11:49:24
第二章 肠杆菌科
肠杆菌科：存在于人、动物肠道，生物学性状相似的一群革兰阴性杆菌无芽胞杆菌。
第一节 概述
一．形态、染色
革兰阴性杆菌、无芽胞，有菌毛，周鞭毛（除志贺、克雷伯、鼠疫），少数有F、R、Col
二．营养要求、培养：多元立体法
气体：需氧气或兼性厌氧，兼具呼吸型或发酵型
营养：要求不高
生长现象：
液体：混浊
血平板：光滑、湿润、灰白色、中等大小菌落
三．生化反应：
生化反应活跃，致病性强的生化反应能力弱。
定科试验：触酶（+），氧化酶（—）硝（+）
四．抗原构造：
O抗原：耐热，颗粒状凝集
H抗原：不耐热，60℃30’破坏
表面抗原：K抗原、Vi抗原
五．遗传变异现象：
1．S—R变异
2．H—O变异
3．其他变异
六．传染途径：
1．致病性肠道杆菌：经口多数，食物中毒、肠热症等。
2．条件致病菌：
为医院感染的主要病原菌群
重要肠道杆菌种类及所致疾病：P183
七．致病物质：
表面抗原
内毒素
肠毒素
八．检验方法：启发引导法
1．标本采集
肠道外：血、尿、体液、呼吸道
肠道内：粪、肛拭
2．分离培养：
肠外标本：增菌（血）→血平板/加Mac
肠内标本：标本→SS、Mac
3．鉴定：
鉴定原则：
生化反应（KIA，IMVIC、MIU）、抗原构造
第二节 埃希菌属
一．微生物检验：
（一）检验程序：
1、项目准备：
（1）标本采集：有血液、尿液、痰液等。
（2）登记
（3）标本处理
2、项目实施：
（1）细菌接种
（2）生化反应
（3）血清学鉴定
（4）药物敏感试验
3、项目结果：
鉴定结果报告
药物敏感试验结果报告
（二）检验方法：案例分析法
1、项目准备：
2、项目实施：
（1）直接镜检（除血液标本外）：
标本直接涂片，革兰染色，显微镜检查
（2）分离培养：
1）血标本：
必须增菌。采用无菌手续抽5ml血液加到50ml增菌液中，经37℃后观察结果。若出现混匀现象等，则转血平板，经37℃后观察结果。根据菌落特征转生化反应鉴定细菌，经37℃后观察结果。做药物敏感试验，作出最终报告。
若不出现混匀现象等，则继续培养7天，期间每天观察，若7天不长，报阴性。
2）尿液：
离心，取沉淀涂片、染色、镜检。尿液沉淀接种血平板及Mac。经37℃后观察结果。根据菌落特征转生化反应鉴定细菌，经37℃后观察结果。
尿→细菌计数（≥105/ul才有诊断价值）
做药物敏感，作出最终报告。
3）粪、脓：
标本接种血平板、弱选择平板经37℃后观察结果。根据菌落特征转生化反应鉴定细菌，经37℃后观察结果，做玻片凝集、药物敏感试验，作出最终报告。
（3）鉴定试验：实践开放法
1）初步鉴定：表18-3
2）最后鉴定：生化反应、试剂盒
3）血清学试验：
①EPEC：分离培养，生化反应、抗原分型（O、K）
②ETEC：分离培养，生化反应，毒素测定
③EIEC：分离培养，生化反应，血清学分型，毒力试验
④EHEC：分离培养，生化反应，血清学分型，有50多个血清型，具有代表性的是O157：H7。
可用山梨醇麦康凯琼脂（SMAC）直接筛选不发酵山梨醇的无色菌落，生化反应符合标准大肠埃希菌生化反应，取次代培养的O157：H7，可用乳胶凝集试验测O157：H7抗原。
3、项目结果：
最终报告：“检出大肠埃希菌”
药物敏感试验结果报告
二、生物学特性：相关知识
（一）形态与染色：
革兰阴性杆菌杆菌、周鞭毛、有菌毛，微荚膜
（二）培养特性：多元立体法
普通平板/血平板：圆、凸、表面光滑、边齐、灰白色菌落，有的菌株有β-溶血环
选择平板：分解乳糖、有色菌落
液体：混浊
（三）生化反应：
葡萄糖（⊕）、乳糖（⊕/—或迟）、蔗糖（⊕/—）IMVIC（++--）
（四）．抗原构造：
1．O、K（L、A、B）、H
2．血清型表示式：O：K：H
（五）．抵抗力：
胆盐、煌绿受抑，对氯、链、庆大敏感，但易耐药。
三．致病性和免疫性：相关知识
（一）．致病物质：
1．侵袭力
（1）．K抗原
（2）．菌毛
2．毒素：
内毒素
肠毒素：不耐热（LT）、耐热（ST）
（二）．所致疾病：多元立体法
1．机会感染：泌尿系统感染等
2．肠内感染
（1）肠产毒型大肠埃希菌（ETEC）
（2）肠致病型大肠埃希菌（EPEC）
（3）肠侵袭型大肠埃希菌（EIEC）
（4）肠出血型大肠埃希菌（EHEC）
（5）肠集聚型大肠埃希菌（EAggEC）